Optec

Бесплатный звонок: 8 800 2000 567
en
Бесплатный звонок: 8 800 2000 567

Бессывороточное культивирование для создания безопасных биомедицинских продуктов

Описание страницы

Бессывороточное культивирование для создания безопасных биомедицинских продуктов

Полный отказ от фетальной бычьей сыворотки — наиболее безопасное решение для выращивания клеток. В этом материале — первые отклики об использовании бессывороточных культуральных питательных сред и заменителей сыворотки.

Значительные успехи в клеточной биологии существенно расширяют перспективы внедрения клеточной терапии и тканевой инженерии в клиническую практику. Применение клеток и тканей в терапевтических целях предъявляет особые требования к безопасности процесса наработки клеток. В частности, вопрос безопасности касается компонентов, которые добавляют в процессе культивирования для питания клеток.

Традиционным и до недавнего времени безальтернативным компонентом культуральных сред является фетальная бычья сыворотка (Fetal Bovine Serum, FBS) — источник факторов роста, гормонов, факторов прикрепления, транспортных и связующие белков. Однако в последние годы наблюдается очевидный тренд по ограничению или полному отказу от применения подобных ксеногенных компонентов и компонентов с неопределенным составом при производстве биомедицинских клеточных продуктов.

В законе ФЗ № 180 «О биомедицинских клеточных продуктах» большое значение отдано обеспечению безопасности биомедицинских клеточных продуктов и анализу риска причинения вреда жизни и здоровью человека при его применении. Однозначно в законе отмечена необходимость регистрации клеточного продукта с обязательным указанием всех компонентов процесса. Это связано с увеличением риска контаминации инфекционными агентами, в т. ч. неидентифицированными, вероятностью попадания остаточных элементов сыворотки и пирогенов в конечный продукт с возможностью неблагоприятной реакции организма человека. Но состав FBS непостоянен, значения ее активных компонентов от лота к лоту могут сильно варьировать, что делает невозможным стандартизацию и приводит к трудностям при сопоставлении результатов и затрудняет регистрацию клеточных продуктов.

Бессывороточное культивирование

Современное решение проблем, связанных с использованием FBS при культивировании, лежит в области бессывороточного культивирования — полного отказа от сыворотки в процессе создания биомедицинских клеточных продуктов.

Понимая актуальность современных запросов в области инновационной медицины, компания ОПТЭК неизменно стремится к пополнению своего портфеля новыми научными разработками. Отмечая живой интерес наших заказчиков к бессывороточным решениям, мы остановили свой выбор на немецкой биотехнологической компании PAN-Biotech.

PAN-Biotech специализируется на производстве продуктов клеточных культур, культуральных сред, факторов роста, биологических препаратов и многих других реагентов для клеточных технологий. В том числе компания разработала и наладила производство бессывороточных культуральных питательных сред и заменителей сыворотки.

PAN-Biotech — новый поставщик на российском рынке, но его продукцию уже оценили лаборатории в разных регионах России:

  1. Национальный Исследовательский Центр Эпидемиологии и Микробиологии им. Гамалеи, Москва

    «Проведена работа по сравнению жизнеспособности первичной культуры спленоцитов мыши в среде Panserin 413 (бессывороточная среда для лимфоцитов, Т-, CIK-, LAK-, NK-клеток) и среде RPMI–1640 с 5% и 10% FBS (фетальная бычья сыворотка). В качестве материала исследовали первичную культуру спленоцитов мыши Balb/c. Среда Panserin 413 показала превосходные результаты. Жизнеспособность спленоцитов в среде Panserin 413 на 8 сутки культивирования составила 80%, тогда как в среде RPMI–1640 c 10% и 5% FBS жизнеспособность клеток была на уровне 55% и 50% соответственно. Кроме того, следует отметить удобство работы с данной питательной средой ввиду отсутствия необходимости приготовления компонентов перед работой.« — Банделюк Алина Сергеевна, м.н.с. лаборатории молекулярной биотехнологии.

  2. Институт Регенеративной Медицины, Москва

    «Проведено сравнение эффективности среды PowerStem MSC1 (готовая среда для культивирования мезенхимальных стволовых клеток) с классическими средами с добавлением FBS (фетальная бычья сыворотка), а также с аналогами других производителей. В качестве материала исследовали мезенхимальные стволовые клетки, выделенные из десны человека. По результатам исследования среда PowerStem MSC1 была названа лучшей бессывороточной средой для мезенхимальных стволовых клеток из исследованных. Также эффективность PowerStem MSC1 при оценке пролиферации клеток была выше по сравнению со стандартно используемой средой альфа-MEM с добавлением сыворотки.« — Крашенинников Михаил Евгеньевич, к.б.н., в.н.с. отдела передовых клеточных технологий.

  3. Центральная научно-исследовательская лаборатория Уральского Государственного Медицинского Университета, Екатеринбург

    «Хорошие результаты были получены при культивировании мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (MMSC) на среде PowerStem MSC1.« — Макеев Олег Германович, д.м.н, проф., заведующий кафедрой Медицинской биологии и генетики, руководитель отдела молекулярных и клеточных технологий и радиоизотопной лаборатории.

  4. Московский Медико-Стоматологический Университет им. Евдокимова, Москва

    «В качестве материала исследовали мезенхимальные стволовые клетки. Рост клеток был выше (примерно в два раза) при использовании заменителя сыворотки Panexin NTAв сравнении с культивированием на базовой среде DMEM / F12 с 10% FBS.« — Лямина Светлана Владимировна, д.м.н., проф. кафедры патологической физиологии.

  5. Национальный Медицинский Исследовательский Центр Онкологии им. Петрова, Санкт-Петербург

    «Проведено исследование безопасности и эффективности использования питательной среды Panserin 416 (бессывороточная среда для дендритных клеток) на основе экспрессии антигенов дифференцировки незрелых и зрелых дендритных клеток. В качестве материала исследовали дендритные клетки. Была показана возможность использовать данную бессывороточную среду для приготовления противоопухолевых вакцин на основе дендритных клеток.« — Нехаева Татьяна Леонидовна, к.м.н., с.н.с. Научного отдела онкоиммунологии.

  6. Институт Цитологии РАН, Санкт-Петербург

    «В качестве материала исследовали дермальные фибробласты человека. Для этого использовали Panserin 401 — бессывороточную среду для широкого спектра как адгезивных, так и суспензионных культур. Данную среду возможно использовать при необходимости отказа от сыворотки в процессе культивирования. Среда не содержит факторов роста, поэтому можно исследовать эффекты специфических факторов роста путем их добавления в среду для культивирования клеток.« — Хотин Михаил Георгиевич, к.б.н., заведующий лабораторией биомедицинских технологий и испытаний с опытным производством.

  7. В Сибирском научном медицинском журнале Астахова Наталья Михайловна с соавторами опубликовали статью про исследование мезенхимальных стромальных клеток, выделенных из костного мозга пациентов с диспластическим коксартрозом (Астахова Н.М., Корель А.В., Орищенко К.Е., Ефремов Я.Р., Кудров Г.А., Кирилова И. А. Культивирование и характеристика мезенхимальных стромальных клеток из костного мозга пациентов с ортопедической патологией // Сибирский научный медицинский журнал. 2018. 38. (1). 38–46.).

    «В нашем эксперименте МСК достигали конфлюэнтности на 16–18 день инкубирования (0 пассаж), без замедления пролиферативной активности клеток и без потери способности к дифференцировке в хондро- и остеогенные типы тканей. Это объясняется применением новой высококачественной, не содержащей сыворотки плодов коров и компонентов животного происхождения, ростовой среды PowerStem MSC1, специально разработанной для пролиферации и длительного культивирования МСК человека без дифференцировки клеток.»

  8. «Биомедицинские инновации», Ростов-на-Дону

    «Использовали заменитель сыворотки Panexin basic для комплементации сред DMEM и IMDM при культивировании клеток HeLa и проведении на этом объекте количественных метаболических исследований. Благодаря стандартизации условий культивирования с точки зрения химического состава культуральной среды, протестированный заменитель сыворотки Panexin basic повышает воспроизводимость и надежность результатов при количественных метаболических исследованиях. Это особенно важно в экспериментах с длительными периодами инкубации клеток без замены среды — и в нашем случае состояние культуры в таких условиях было стабильным как минимум неделю при использовании IMDM.« — Золотухин Петр Владимирович, к.б.н., директор.

  9. Кубанский Государственный Медицинский Университет, Краснодар

    «Среда Panserin 413 была использована для получения дендритных клеток моноцитарного происхождения, цитокин-активированных киллеров (CIK) и регуляторных Т-клеток. Получены устойчивые культуры дендритных клеток заданного фенотипа от разных доноров. На основе данной среды удавалось добиться более 1000-кратной пролиферации культуры цитокин-активированных киллеров и регуляторных Т-клеток. В базовом исполнении среда Panserin 413 может быть прекрасной основой для создания бессывороточной культуральной среды предназначенной для культивации указанных типов клеток, использование которых служит цели создания клеточных вакцин для адоптивной терапии.« — Гудков Георгий Владимирович, д.м.н., проф. кафедры клинической иммунологии, аллергологии и лабораторной диагностики ФПК и ППС.

x